Question/Réponse en Western Blot : aucune bande obtenue
QUESTION / RÉPONSE TECHNIQUE
QUESTION
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En IHC, lors de la caractérisation de xénogreffes de tumeurs humaines transplantées dans un modèle souris, il est difficile de trouver un anticorps spécifique uniquement de l’humain tout en ayant un système permettant de marquer les tissus de souris pour visualiser l’environnement de la tumeur.
Quelles sont les préconisations expérimentales à suivre dans ce cas précis ?
RÉPONSE
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Pour de nombreuses cibles, les séquences humaines et murines sont identiques ou assez proches et l’anticorps ne peut donc pas les différencier. Si on ne dispose que d’un anticorps qui reconnait la forme murine et humaine mais que seul le marquage des cellules humaines est souhaité, un double marquage en fluorescence devra être réalisé.
Par exemple, on peut utiliser un anticorps humain spécifique tel que #4850 COX IV (3E11) Rabbit mAb pour marquer exclusivement les cellules humaines. Seules les cellules doublement positives correspondent aux cellules humaines et celles simplement marquées correspondent aux cellules murines.


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